豬組織蛋白酶ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中豬組織蛋白酶 B(cath-B)水平。用純化的豬組織蛋白酶 B(cath-B)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組織蛋白酶 B(cath-B),再與 HRP 標記的 cath-B 抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的組織蛋白酶 B(cath-B)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中豬組織蛋白酶 B(cath-B)濃度。
組織蛋白酶是在各種動物組織的細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一類蛋白酶。此名源自希臘語的“消化”,來源于同一種類組織細胞的也是由組織蛋白酶A.B.C.D.E等多種酶組成。可以根據(jù)所作用的代表性底物的種類進行分類,但似乎各自還有數(shù)種同工酶。組織蛋白酶A的代表性底物是N-芐氧基羰基-L-谷酰胺-L-苯丙氨酸,可能是一種羧肽酶,可為二異丙基磷氟酸(DFP)或?qū)β裙郊姿幔≒CMB)失活。組織蛋白酶B催化苯甲酰-L-精氨酰胺的水解。其活性的表現(xiàn)需要巰基化合物(SH化合物)的存在,pH在6附近,有人認為是類似木瓜蛋白酶的肽鏈內(nèi)切酶,已知有B1和B2(或B′和B)二種。組織蛋白酶C的代表性底物是甘氨酰-L-苯丙酰胺,在pH5附近催化此酰胺鍵的水解,在pH7附近時催化以其它底物分子的氨基代替水分子作為受體的轉(zhuǎn)移反應(yīng),亦稱為二肽氨肽酶Ⅰ或二肽轉(zhuǎn)移酶。能為巰基化合物或Cl-離子所激活。組織蛋白酶D和E可以使用ES010(MCA-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2)或ES001(MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2)作為底物。兩者在pH2.5—4.0顯有消化酸變性的血紅蛋白或血清白蛋白的肽鏈內(nèi)切酶的作用。巰基化合物對活性沒有影響,DFP也不抑制。
豬組織蛋白酶ELISA試劑盒的特點:
1.敏感性高,特異性強;
2.節(jié)約材料與耗材,縮短時間,節(jié)省經(jīng)費;
3.嚴格控制在適宜的溫度下進行;
4.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上;
5.公司另有標準品,對照品,抗體等科研實驗產(chǎn)品的供應(yīng);豬組織蛋白酶ELISA試劑盒適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。我們對所售任何產(chǎn)品一概負責到底,每一份實驗結(jié)果都真實可靠!