胰島素ELISA試劑盒利用雙抗夾心法,在96孔板中預(yù)包被了小鼠胰島素蛋白的單克隆抗體,將標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)控品,以及樣品加入到96孔板中孵育結(jié)合,經(jīng)過洗滌,再加入 HRP-偶聯(lián)的胰島素多克隆抗體進(jìn)行孵育,在加入TMB底物,HRP與底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物。吸光值越高,對應(yīng)樣品中胰島素含量越多。
首先,我們先來了解什么是胰島素?
胰島素,是一種蛋白質(zhì)激素,由胰臟內(nèi)的胰島β細(xì)胞分泌。胰島素參與調(diào)節(jié)糖代謝,控制血糖平衡,可用于治療糖尿病。人胰島素蛋白由51 個氨基酸,分子量為 5808道爾頓。它是二硫鍵連接A鏈和B鏈的二聚體。動物種類之間的胰島素結(jié)構(gòu)略有不同。由于這些變化,來自動物來源的胰島素在人胰島素的有效性(碳水化合物代謝效應(yīng))方面有所不同。豬胰島素與人類的胰島素特別接近,在人胰島素可以通過重組DNA大量產(chǎn)生之前被廣泛用于治療1型糖尿病技術(shù)。
胰島素是胰島β細(xì)胞分泌的一種肽激素。 它通過增強(qiáng)葡萄糖,氨基酸和某些離子的膜運(yùn)輸來調(diào)節(jié)碳水化合物,蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的代謝。 它還促進(jìn)糖原的儲存,甘油三酸酯的形成以及蛋白質(zhì)和核酸的合成。 胰島素是由前體肽胰島素原產(chǎn)生的51個氨基酸的多肽產(chǎn)物。 胰島素原在翻譯后被切割成兩條鏈(肽A和肽B),它們通過兩個二硫鍵和一個C肽分子共價連接。 胰島素缺乏會導(dǎo)致糖尿病,這是普通人群發(fā)病和死亡的主要原因之一。 胰島素還存在于b細(xì)胞起源的腫瘤(例如胰島素瘤)中。
胰島素ELISA試劑盒固相夾心ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)是測量匹配的抗體對之間結(jié)合的靶標(biāo)量。 已在孔中預(yù)包被了靶標(biāo)特異性抗體。 然后將樣品,標(biāo)準(zhǔn)液或質(zhì)控品添加到這些孔中,并與固定的(捕獲)抗體結(jié)合。 通過添加第二(檢測)抗體形成三明治,添加底物溶液,該底物溶液與酶-抗體-靶標(biāo)復(fù)合物反應(yīng)以產(chǎn)生可測量的信號。 該信號的強(qiáng)度與原始樣品中存在的靶標(biāo)濃度成正比。