胰島素ELISA試劑盒的主要成分及在實驗中所需材料分享
胰島素ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品液配制,使用前加入0.3ml蒸餾水混勻,配成8000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在一管中加入8000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。
胰島素ELISA試劑盒的主要成分有哪些呢?
1、微孔板:12×8,96孔,包被抗胰島素的單克隆抗體。
2、零標(biāo)準(zhǔn)品 :1支,3ml,即用,0μIU/ml。
3、標(biāo)準(zhǔn)品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。
4、酶聯(lián)物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠單克隆抗體。
5、酶復(fù)合物:1支,7ml,即用,辣根過氧化物-鏈親和素復(fù)合物。
6、TMB底物液:1支 14ml 即用。
7、終止液: 1支 14ml 即用 包含0.5M硫酸,請勿接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。
8、洗滌液:1瓶,30ml,40倍濃縮,見試劑準(zhǔn)備。
注意:用樣品稀釋的零標(biāo)準(zhǔn)品視需要而定。
胰島素ELISA試劑盒在做實驗時,須準(zhǔn)備好下面這些材料:
1、酶標(biāo)儀
2、標(biāo)準(zhǔn)移液器
3、吸水紙
4、蒸餾水
標(biāo)本的采集及保存
1、血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于1000g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、其它生物標(biāo)本:請1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:以上標(biāo)本均應(yīng)密封保存,4保存應(yīng)小于1周,-20不應(yīng)超過1個月,-80不應(yīng)超過2個月;標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。