人白介素ELISA試劑盒應為無沉淀的液體。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清和組織勻漿。從1ml全血中可獲得0.5ml血清或血漿。每個樣品的體積=100ul×種。
人白介素ELISA試劑盒之樣本的處理方法及要求介紹:
1、血清:室溫下血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。應仔細收集上清液,并再次離心,以防在儲存期間沉淀。
2、血漿:根據(jù)標本要求選用EDTA或枸櫞酸鈉作為抗凝劑,混勻10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。應仔細收集上清液,并再次離心,以防在儲存期間沉淀。
3、尿液:用無菌管收集,離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。應仔細收集上清液,并再次離心,以防在儲存期間沉淀。胸、腹水和腦脊液應作為參考。
4、細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌成分時,用無菌管收集。離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清液。細胞懸液用PBS(ph7.2-7.4)稀釋,細胞濃度約為100萬/ml,反復凍融破壞細胞。離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清液。儲存過程中如有沉淀,應重新離心。
5、組織標本:切好標本后,稱重。加入一定量的PBS,pH7.4。液氮冷凍保存。試樣熔化后仍保持在2~8℃。加入一定量的PBS(pH7.4),用手或勻漿機勻漿。離心約20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清液。分裝后,一份要檢驗,其余的要冷凍。
6、人白介素ELISA試劑盒樣品采集后應盡快提取,提取應參照相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。如果不能立即進行試驗,可將試樣存放在-20℃下,但應避免反復凍融。
7、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3以制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。